用途:热释光测量仪是研究光合作用的强有力的工具,是研究PSII电子传输的有效探针,广泛应用于除草剂对PSII的受体效应、QA与QB稳定性、光合放氧复合物(OEC)稳定性及PSII总体完整性等,还用于光合突变个体的筛选等。
TL6000系列热释光测量仪是针对研究PSII能量水平结构而设计的。PSII反应中心光诱导电荷分离导致储存了吸收光能的激发电子对的累积。加热诱导这些激发电子对的重组,从而引发光释放,并在一定温度范围内形成特异性热释光曲线。根据不同释光曲线的形状、峰位和峰值,可以研究分析关于特定激发电子对的能量稳定性及PSII反应中心功能等。TL200系列热释光测量仪有三种不同型号,测量范围从-90°C到+190°C可选,使用范围更宽,可以对低温、高温段热释光进行研究。
原理:热释光(Thermoluminescence,缩写TL)是晶体受到辐射照射后,会产生自由电子,这些电子被晶格缺陷俘获而积攒起来,在加热过程中以光形式释放出来。其基本的实验过程是将叶片快速冷冻到某一温度,之后给叶片一个足够强,但时间尽量短(一般<5µs)的单翻转光(single turn-over flash),用于诱导每个PSII反映中心发生仅一次的电荷分离;然后逐渐升温,同时测量叶片放出的热释光,绘制TL谱带。
热释光研究中的一个主要工具是单次翻转光闪,要求足够强(光源强度高达 150 000 µmol(photons).m-2.s-1)和足够短(典型 < 5 微秒)来诱导每一个PSII反应中心发生一次,且仅一次的电荷分离。光闪的饱和效果可以通过QB段的强度来检查,它应该在首次光闪后达到最大,在2次光闪后不再增加。当前许多实验中使用的氙灯光闪具有明显缺陷——一个长的持续发光,或者“闪光拖尾”,这会在某些PSII反应中心中产生两次的电荷分离(连击)。虽然激光闪光能够有效降低连击,但不能消除。
TL6000系列热释光测量仪使用能量足够强的LED光源,所释放5-10µs的方波脉冲能够饱和所有的PSII反应中心,其温度控制单元可以在降温后,再使样品的温度以0.1℃/sec到 2℃/sec的速率线性增加。不同的闪光序列及样品处理能够使样品处于不同的能量状态,不同的温度下释放的光能源自光合机构的不同结构。分析释光曲线的形状、峰位和峰值,可以研究分析关于特定激发电子对的能量稳定性及PSII反应中心功能等。
特点:
·不同型号可选,测量温度范围宽,从 -25 至 +200 °C;
·可变高光强光源(627nm)用于S状态跃迁分析;
·可变长时间光源(627nm)用于预定温度下的照明;
·用于检测热释光峰值检测的灵敏光电倍增二极管;
·程序控制电子阀门保护光电倍增二极管;
·环境光保护,确保测量都在标准实验室条件下进行;
·测量室内强制输送空气(仅TL 6000/ST);
·含电磁阀的液氮罐(仅TL 6000/ET);
应用领域:
·光合机理研究——捕光色素复合体,PSII反应中心,放氧复合物研究;PSII能级分析;原初反应阶段的内在过程探测;
·植物胁迫生理的早期检测与诊断;
·植物病虫害相关研究;
·除草剂影响;
·对植物光合研究的完善补充;
系统组成:
主要有3部分组成:多功能控制单元、温度调节控制单元和测量室。
多功能控制单元:根据用户定义方案或已置实验程序运行实验,两个输入通道分别用于测量热发光信号(TL信号)和测量温度。测量曲线有两种显示格式:时间/温度和时间/TL,或者温度/TL信号。
温度调节控制单元:可以在-25°C 到 +200°C范围内以0.1°C的精确度控制样品的温度。系统前面板可以显示实际的温度,可以通过手动或软件调节温度。有恒温和温度梯度两种模式(0.1°C/sec到 2°C/sec线性变化);
测量室包含四个部分:光源、光电倍增管、A/D转换器、具有温度控制器的样品盘。
1.光源由8个超亮发光二极管(λmax=630 nm)组成,发射的光闪强度高达150,000 µmol(photons). m-2.s-1以上,光闪持续时间最长为150 µs(典型5-10us),光强和光闪持续时间通过软件控制;
2. 光电倍增器可以探测从300到900nm范围的光量子,从而测量热发光信号和缓发荧光。光电倍增器包括自己的电源;
3.A/D转换器用于光电倍增器的电流放大、软件控制增益和数字化,放大器的时间反应固定在50ms,以确定最小取样周期到100ms;
技术参数:
温度控制范围 | 标准温度版TL 6000/ST:-25~+70℃; 扩展温度版TL 6000/ET:-100~200℃; |
控制模式 | 恒定;线性改变,1.5℃/秒~1.8℃/秒 |
过热保护 | 是 |
最小采样周期 | 100毫秒 |
控制方式 | 手动(恒温),程序定义的温度曲线 |
样品盘 | 镀金铜; 标准版和低温版:直径14mm 高温版:直径22mm |
典型样品 | 藻类、蓝藻细菌悬浮液和叶圆片 |
光源 | 饱和脉冲光623nm,强度高达300000 µmol(photons)/m2/s; 光化光627nm,强度高达2000 µmol(photons)/m2/s; |
检测器 | 可以通过软件灵敏控制的光电倍增器 |
光谱响应 | 300~900 nm |
接通延迟 | 100毫秒 |
环境光保护 | 提供 |
定制程序 | 可设定时间,专用语言和脚本 |
通讯端口 | 串口或USB |
软件 | FluorWin3.7 |
供电 | 90~240V |